Es sollte folgendermaßen verfahren werden:
Tab. VIII: EM-Einbettung
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Cacodylatpuffer: Aceton (Entwässerung) |
Aceton + Spurrgemisch |
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Zeit [h] |
1/4 |
1/4 |
1/4 |
1/4 |
1/4 |
1/4 |
¯ |
1 |
1 |
14* |
4 |
Verdünnung |
15:85 |
30:70 |
50:50 |
75:25 |
90:10 |
2x 100 |
3x 100 |
75+25 |
50+50 |
25+75 |
100 |
*) Hierbei wurden die Schnappdeckelgläser nicht fest verschlossen, so daß das Aceton verdampfen konnte. So verblieb im Schnappdeckelglas bis zum nächsten Morgen ein 100%iges Spurrgemisch.
Chemikalien für die elektronenmikroskopische Präparation
Bleicitrat: |
Nach Reynolds (1963) werden 1,33 g Pb(NO3)2 und 1,76 g Na3(C6H5O7) [2 H2O] zu 30 ml frisch abgekochtem Wasser gegeben. Während eines 30minütigen Schüttelns entsteht aus Bleinitrat Bleicitrat. |
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Cacodylatpuffer: |
(C2H6AsNaO2×3H2O) |
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Formvar: |
0,4%ige Lösung in Chloroform |
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Glutaraldehyd: |
2% (C5H8O2) [giftige Dämpfe] |
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Osmiumtetroxid: |
2% (OsO4) in Wasser, eine schwache Osmiumsäure (H2OsO5) entsteht [sehr giftig (t+) - giftige Dämpfe] |
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Spurr-Einbettung: |
Spurr (1969), (LVG = Low Viscosity Gemisch), Zusammensetzung: |
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5,0 g VCD (E.R.L. 4206, Vinycyclohexendioxid) |
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3,0 g D.E.R. 736 (Diglycidäther von Propylenglycol = Weichmacher) |
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13,0 g NSA (Nomenyl-Bernsteinsäureanhydrid = Härter) |
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0,2 g DMAE (S-1, Dimethylaminoethanol = Beschleuniger) |
Uranylacetat: |
In Aqua bidest. angesetzte, gesättigte Lösung wird verwendet (lichtempfindlich). |
Autor: T. Huckfeldt