DMSO diente als Lösungsvermittler und zur besseren Aufnahme der Farbstoffe in die Zelle, da es auch die Durchlässigkeit der Membranen leicht erhöht.
Wahl des pH-Wertes für die Vitalfluorochromierung
Für die ersten Untersuchungen mit den Vitalfluorochromen an Hyphen wurde ein pH-Wert von 9 gewählt. Angenommen wurde, daß durch den Unterschied der pH-Werte des Puffers und des lebenden Plasmas der Hyphen möglicherweise eine unterschiedliche Färbung zustande kommen könnte. Um Unterschiede der Farbstoffe bei verschiedenen pH-Werten zu ermitteln, wurden Spektren bei verschiedenen pH-Werten aufgenommen.
Pufferlösungen
Da die Farbstoffe je nach dem pH-Wert des Mediums unterschiedliche Eigenschaften haben können (Cohn 1961, Harms 1965, Drawert 1968), wurden die Untersuchungen meist bei fünf verschiedenen pH-Werten ausgeführt: pH-Werte.
Tab. IV: Mischungsverhältnisse für 100 ml Phosphatpuffer
pH-Bereich |
M/10 HCl * |
M/15 KH2PO4* |
M/15 Na2HP4* |
M/15 K3PO4* |
H2O |
2,8... 3... 3,2 |
3,0 ml |
7,0 ml |
- |
- |
90 ml |
4,7... 5... 5,2 |
- |
9,9 ml |
0,1 ml |
- |
90 ml |
7,0... 7... 7,2 |
- |
5,0 ml |
5,0 ml |
- |
90 ml |
8,9... 9... 9,1 |
- |
7,0 ml |
- |
3,0 ml |
90 ml |
11,8...12...12,1 |
- |
- |
1,0 ml |
9,0 ml |
90 ml |
"*" von Merck